AAT Bioquest 生產(chǎn)的小麥胚芽凝集素（WGA）能與N-乙酰葡萄糖胺和唾液酸結(jié)合，是目前研究較多且有用的凝集素之一。小麥胚芽凝集素可用于標記細胞膜（如：活細胞、固定細胞、組織切片、酵母、革蘭氏陽性**及**等 ），從而進行熒光成像和分析。也可用于**熒光（IF）、**組織化學（IHC）和流式細胞術(shù)（FC）。
圖1.HeLa 細胞用濃度為 10 μg/mL 的 mFluor? Violet 450小麥胚芽凝集素 (WGA) 探針染色 30 分鐘。使用配備紫羅蘭濾光片組的熒光顯微鏡獲取的圖像。
mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針優(yōu)勢：
1.應(yīng)用廣泛；
2.不受膜電位控制；
3.用于細胞膜表面的標記，有助于膜結(jié)構(gòu)的成像
mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針參數(shù)
Ex(nm)
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406
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Em(nm)
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445
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溶劑
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Water
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存儲條件
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在-15℃以下保存，避光防潮
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mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針適用儀器
熒光顯微鏡
Ex
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406nm
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Em
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445nm
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推薦孔板
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黑色透明底板
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mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針實驗方案
樣品分析方案
溶液配制
儲備溶液配制
mFluor 450 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物儲備液 (200X)
將 500 μL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的儲備溶液。
注意：重新配制的綴合物溶液可在 2-8 °C 下短期儲存，或在 -20 °C 下長期儲存。
工作溶液配制
mFluor 450 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物工作溶液 (1X)
將 5 μL 200X WGA 儲備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。
注意：不同細胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同。 活細胞的推薦起始濃度為 5-10 μg/mL。
操作方案
活細胞染色
1. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。
2. 添加 100 μL mFluor 450-WGA 工作溶液。
3. 將細胞與 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分鐘。
4. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。
5. 使用 Ex/Em = 406/445 nm在熒光顯微鏡上成像細胞。
固定細胞染色
1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定細胞。
注意：對于固定細胞膜染色，建議在沒有透化步驟的情況下進行染色。固定后透化步驟會導致細胞內(nèi)區(qū)室染色，如高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (ER) 結(jié)構(gòu)染色。
2. 添加 100 μL mFluor 450-WGA 工作溶液。
3. 在室溫下，用 WGA 工作溶液孵育細胞 10-30 分鐘。
4. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。
5. 使用Ex/Em = 406/445 nm在熒光顯微鏡上成像細胞。