細(xì)胞活性的檢測通常與細(xì)胞健康以及細(xì)胞群成功存活并正常運作的能力相聯(lián)系,檢測細(xì)胞的活性是每個細(xì)胞實驗前期的重要工作之一。今天百螢為大家推薦四種實用性很強的用于細(xì)胞活性檢測的方法。1.染色排除法;2.還原性染料檢測法;3.熒光酯酶底物檢測法;4.線粒體膜電位檢測法。
檢測細(xì)胞活力的方法
染色排除法
使用不滲透細(xì)胞的染料區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。由于死細(xì)胞膜破裂,染料流入細(xì)胞并被染色,而活細(xì)胞則不染色。臺盼藍(lán)或其他不滲透細(xì)胞的DNA結(jié)合染料是這中方法中的*常用染料。
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Live或Dead 可固定死細(xì)胞染料
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細(xì)胞核DCS1死細(xì)胞染料
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臺盼藍(lán)染料
還原性染料檢測法
氧化還原活力是與細(xì)胞代謝/種群存活細(xì)胞相關(guān)聯(lián)的。使用發(fā)光/熒光指示劑,WST-8和刃天青,以監(jiān)測細(xì)胞的代謝活性。WST-8和刃天青的低細(xì)胞毒性便于需要更長孵育時間的測定。
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Cell Meter 比色法WST-8細(xì)胞定量試劑盒
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WST-8檢測試劑
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刃天青鈉鹽
熒光酯酶底物檢測法
細(xì)胞滲透型酯酶底物通過測量細(xì)胞酶活性和膜完整性來確定細(xì)胞活性。在擴散到活細(xì)胞中后,細(xì)胞內(nèi)酯酶將所述底物水解成熒光化合物,該熒光化合物能夠保留在細(xì)胞內(nèi)一段時間,產(chǎn)生的信號強度與活細(xì)胞數(shù)量成正比??梢允褂脽晒鈨x器監(jiān)測。
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Cell Meter 細(xì)胞活性檢測試劑盒
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Cell Meter 細(xì)胞活性檢測試劑盒(活細(xì)胞/死細(xì)胞)
線粒體膜電位檢測法
線粒體膜電位(ΔΨm)的喪失是細(xì)胞凋亡的早期特征,可以使用膜電位探針間接檢測細(xì)胞活性。這些陽離子探針易于通過Δm隔離并染色活性線粒體,以鑒定活細(xì)胞。
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JC-1
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JC-10(JC-1的升級產(chǎn)品)
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TMRM和TMRE
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羅丹明123
表1.評估細(xì)胞活性和細(xì)胞毒性的常用參數(shù)和方法
檢測類型
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方法
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試劑實例
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細(xì)胞膜完整性
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使用死細(xì)胞染料檢測膜的完整性。膜受損的死細(xì)胞容易吸收這些染料并被染色。
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細(xì)胞核 DCS1染料
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碘化丙啶PI
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臺盼藍(lán)及其衍生物
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細(xì)胞內(nèi)酶活性
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將染料加入活細(xì)胞中,通過檢測細(xì)胞內(nèi)酶活性來檢測細(xì)胞活性
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鈣黃綠素 藍(lán),AM
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鈣黃綠素 綠,AM
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鈣紫藍(lán)素450
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線粒體膜電位(ΔΨm)
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使用可透過ΔΨm并累積在線粒體中的細(xì)胞滲透性染料來鑒定活細(xì)胞。
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細(xì)胞代謝
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使用不滲透細(xì)胞的四唑鹽監(jiān)測細(xì)胞的代謝活性
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WST-8檢測試劑
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Cell Meter 比色法WST-8細(xì)胞定量試劑盒
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檢測整個細(xì)胞群體的細(xì)胞氧化還原電位
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使用生物發(fā)光檢測來測量ATP和ADP。ADP / ATP比值的變化可用于區(qū)分細(xì)胞死亡和生存能力。
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PhosphoWorks 比色ATP分析試劑盒
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D-熒光素
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熒光素酶
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