產(chǎn)品編號：17501（1mg）  

保持在-20°C并干燥

物理化學(xué)性質(zhì)：

分子量：1270.43

溶劑：水和DMSO

激發(fā)= 546nm

發(fā)射= 647nm

結(jié)構(gòu)式

生物應(yīng)用

7-氨基放線菌素D（7-AAD）是一種非滲透性染料，可用于鑒定非活細(xì)胞。 細(xì)胞用受損的質(zhì)膜或受損/無細(xì)胞代謝不能阻止染料進入細(xì)胞。 一旦在細(xì)胞內(nèi)，染料與細(xì)胞內(nèi)DNA結(jié)合，產(chǎn)生高度熒光的加合物，使細(xì)胞識別為無活力。它廣泛用于流式細(xì)胞儀。 7-AAD可以被488nm的氬激光激光線激發(fā)在650nm以上檢測到熒光。 雖然7-AAD的發(fā)射強度低于碘化丙啶（PI）的發(fā)射強度，較長波長的發(fā)射使其更適用于多重測定與其他488 nm激發(fā)的組合由于這些發(fā)射之間的光譜重疊極小，因此熒光染料如FITC和PE。

染色細(xì)胞的樣本方案

通常在所有其他染色后進行7-AAD染色。 它只會污染死細(xì)胞。 以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。 生長培養(yǎng)基，細(xì)胞密度，其他細(xì)胞類型的存在和其他因素可能影響染色。 玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物的真實或明顯的染色明亮染色的材料出現(xiàn)在有或沒有細(xì)胞存在的溶液中。

1）。制備1-10mM DMSO儲備溶液。如果儲存在-20°C，DMSO儲備溶液可以使用6個月。

2）。使用適合您樣品的固定方案。

3）。通過離心沉淀細(xì)胞，并用染料將細(xì)胞重懸于緩沖鹽溶液或培養(yǎng)基中

在pH 7.4下染色。培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。

4）。使用0.5至5μM的濃度添加7-AAD染色，并將其孵化15至60分鐘作為指導(dǎo)。

注意：在開始的實驗中，在整個建議范圍內(nèi)嘗試幾種染料濃度

確定產(chǎn)生*佳染色的濃度。

5）。在Ex / Em = 545 / 650nm處測量熒光強度（使用FL3進行流式細(xì)胞分析）

注意：7-AAD是一種潛在的致癌物質(zhì)。建議用戶戴上手套，防護服，和保護眼睛/面部，避免接觸皮膚和眼睛。

參考文獻

1. Kovalev AE, Iakovenko AA, Vekshin NL. (2004) [A study of interaction of 7-aminoactinomycin D with DNA by fluorescence correlation spectroscopy]. Biofizika, 49,1030.

2. Gaforio JJ, Serrano MJ, Algarra I, Ortega E, Alvarez de Cienfuegos G. (2002) Phagocytosis of apoptotic cells assessed by flow cytometry using 7-Aminoactinomycin D. Cytometry, 49, 8.